INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMÉDICAS EN RETROVIRUS Y SIDA
ex Centro Nacional de Referencia para el Sida
El Laboratorio de citometría de flujo del INBIRS proporciona a los usuarios los servicios de análisis celular por citometría de flujo y de separación celular o cell sorting.
Los equipos del laboratorio se encuentran adheridos al Sistema Nacional de Citometría de Flujo (SNCF). Mas información aquí.
Para acceder a los servicios, los usuarios deben primero contactarnos al email citometriainbirs@gmail.com con el objetivo de coordinar los detalles del servicio (asesoramiento y/u optimización de los ensayos), para luego confirmar la reserva del turno a través del Sistema de Gestión de Turnos (SGT) del SNCF, accediendo al siguiente link.
El citómetro FACS Canto A posee tres fuentes láser, y presenta una capacidad de detección de diez detectores (ocho de fluorescencia y dos de dispersión de luz).
Laser | PMT position | BP Filter | LP mirror | Intended Dye |
488 nm | A | 780/60 | 735LP | Pe-Cy7 |
B | 670LP | 655LP | PerCP, PerCP-Cy5.5 | |
C | 585/42 | 556LP | PE, PI | |
D | 530/30 | 502LP | FITC, Alexa 488 | |
633 nm | A | 780/60 | 735LP | Apc-Cy7, Alexa750, Alex780, APC-eFluor 750 |
B | 660/20 | APC, Alex633, Alex647, To-PRO-3 | ||
C | Blank | |||
Violet 405nm | A | 525/50 | 505LP | BV450/V500 |
B | BV421/450 |
Este equipo posee un sistema de detección de 14 fluorocromos, 3 fuentes láser y capacidad de separación celular o sorting de hasta 4 vías. Capacidad de recibir la muestra en tubos/ placa multiwell/ clonado por célula única/ portaobjetos. También posee puerto de muestra con control de temperatura, aumentando así la viabilidad celular durante los procedimientos de separación celular (4°C, 20°C o 37°C).
El equipo FACSAria Fusion presente en el INBIRS está equipado con los siguientes láseres y la configuración de detectores que se detalla:
Laser | Detector | Parameter | Longpass Mirror | Bandpass Filter |
Laser Violeta 405 nm | F | Pacific Blue, V450, VPD450, DAPI BV421, AF405 | NA | 450/40 |
E | BV510, AmCyan, V500 | 505LP | 525750 | |
D | BV605 | 595LP | 610/20 | |
C | BV650 | 630LP | 660/20 | |
B | BV711 | 585LP | 710/50 | |
A | BV786 | 750LP | 780/60 | |
Laser Azul 488nm | F | SSC | 48810 | |
E | FITC, BB515 | 502LP | A530/30 | |
D | PE | 556LP | 585/42 | |
C | PE-CF594 | 610LP | 616/23 | |
B | PerCP-Cy5.5, PI, BB700 | 655lp | 695/40 | |
A | PE-Cy7 | 735LP | 780/60 | |
Laser Rojo 633 nm | C | APC, AF647 | 670/30 | |
B | Alexa 700 | 690LP | 730/45 | |
A | APC-Cy7, APC-H7 | 755LP | 780/60 |
Características de bioseguridad:
El equipo está instalado dentro de un laboratorio BSL2+ y acompañado de una cabina de seguridad biológica que posee un sistema de contención de aerosoles (AMS). Estas características permiten la protección tanto del operador como de la muestra, haciendo posible la opción de separación celular en modo aséptico con recepción de la muestra en esterilidad para su posterior cultivo. Asimismo, dichas condiciones permiten el trabajo con patógenos asociados a prácticas pertenecientes al Nivel de Bioseguridad 3 (BSL3).
Control de calidad: para asegurar la calidad en la adquisición y reproducibilidad de los ensayos en citometria, ambos equipos son evaluados diariamente mediante BD™ Cytometer Setup and Tracking (CST).
El laboratorio de microscopia del INBIRS proporciona a los usuarios los servicios de adquisición y análisis de imágenes de fluorescencia. Los equipos se encuentran en un laboratorio de bioseguridad BSL2, por este motivo, el uso de estos equipos está dirigido a usuarios que trabajen con muestras de patógenos de ese nivel de bioseguridad.
Para acceder a los servicios, los usuarios deben contactar al email microscopiainbris@gmail.com para el coordinar los detalles del servicio y luego confirmar la reserva del turno a través del Sistema de Gestión de Turnos (SGT) del SNM (Sistema Nacional de Microscopía), accediendo al siguiente link
Microscopio invertido confocal de barrido láser que obtiene imágenes precisas en tres dimensiones (X, Y, Z). Contiene un sistema optico long pass (LP) y Dicroico Secundario Variable (VSD) para aplicaciones de barrido espectral y configuraciones según la necesidad del usuario. El Software utilizado para la adquisición de imágenes es el Zen 2.3. Cuenta con los objetivos: 10X (AN: 0.3 Aire); 40X (AN: 0.75 Aire); 63X (AN: 1.4 Aceite)
Lasers LED: 405 nm; 488 nm; 561 nm; 640 nm
Microscopio invertido de epifluorescencia. Cuenta con un sistema Nikon de automatización para toma de imágenes microscópicas en intervalos de tiempos programados “Time Lapse”. Cuenta con una platina motorizada en el eje Z, permitiendo tomar imágenes en los tres ejes (X, Y, Z). Adquisición con el software NIS-Element. Con objetivos: 4x (AN: 0.1 Aire); 10X (AN: 0.30 Aire); 20X (AN: 0.45 Aire); 60X (AN: 1.4 Aceite); 100X (AN: 1.4 Aceite).
Cuenta con los siguientes filtros:
DAPI: Filtro de excitación: 340/380 nm; Espejo: 400 nm; Filtro de emisión: 435/485
FITC: Filtro de excitación: 465/495 nm; Espejo: 505 nm; Filtro de emisión: 515/555
TRITC: Filtro de excitación: 530/560 nm; Espejo: 570 nm; Filtro de emisión: 590/650
Cy5: Filtro de excitación: 530/560 nm; Espejo: 570 nm; Filtro de emisión: 590/650